Znaczenie kliniczne ekspresji mieloid-antygen w ostrej białaczce limfoblastycznej wieku dziecięcego ad

Zliczono co najmniej 500 komórek. Próbki rutynowo wybarwiano barwnikiem Wrighta-Giemsy, odczynnikiem periodycznego acidSchiff i plamką z czarnej B Sudanu i wybarwiano je na obecność merooperoksydazy i esterazy kwasu alfa-naftylowego. Białaczki poddano podklasyfikacji jako L1 lub L2, zgodnie z klasyfikacją francusko-amerykańsko-brytyjską.20, 21 Analizę cytogenetyczną przeprowadzono po hodowli komórek szpiku kostnego w RPMI 1640 (Irvine Scientific, Santa Ana, CA) przez 24 do 72 godzin, zebrano i traktowano demekolcyną (Colcemid) przez godzinę. Komórki traktowano hipotonicznym roztworem chlorku potasu (0,4 procent) i utrwalano w kwasie metanolowo-octowym (3: 1). Przygotowano szkiełka i wykonano banding Giemsa.
Immunofenotypowanie
Przygotowanie komórki
Próbki szpiku kostnego traktowane heparyną rozcieńczono 1: buforem Hanksa z roztworem soli fizjologicznej (Irvine Scientific), nawarstwiono na gradienty Ficoll-Hypaque (Pharmacia, Piscataway, NJ) i odwirowano przy 2000 obr / min przez 30 minut. Jednojądrzaste komórki zebrano na granicy faz Ficoll-Hypaque i osocza i przemyto dwa razy zbuforowanym roztworem soli fizjologicznej Hanksa. Po ostatnim przemyciu komórki ponownie zawieszono w RPMI 1640 z L-glutaminą (2 mM), penicyliną (50 U na mililitr) i dodano streptomycynę (50 mg na mililitr).
Przeciwciała monoklonalne
Tabela 1. Tabela 1. Determinanty antygenowe. Panel monoklonalny-przeciwciało został wybrany do identyfikacji antygenów różnicujących specyficznych względem układu limfatycznego i mieloidalnych (Tabela 1). Zastosowanie panelu przeciwciał pozwoliło zidentyfikować zarówno rodowód, jak i etap różnicowania komórek białaczkowych.
Pośrednia immunofluorescencja
Komórki białaczkowe inkubowano z optymalnymi stężeniami każdego przeciwciała monoklonalnego (na podstawie zaleceń producenta) przez 30 minut w temperaturze 4 ° C. Komórki przepłukano dwukrotnie w Sorvall Cell Washer (Ortho Diagnostic Systems, Raritan, NJ) z Immusal (American Dade, Denville, NJ) i inkubowano z 50 ml rozcieńczenia 1:20 powinowactwa z koniugatem izotiocyjanianu fluoresceiny (FITC). oczyszczona immunoglobulina kozia antimouse (GAM-FITC) (Cappel, Cooper Biomedical, West Chester, PA). Po dwukrotnym przemyciu komórek utrwalono je 1% paraformaldehydem i analizowano za pomocą sortownika komórek aktywowanych fluorescencyjnie Coulter Epics V lub cytometru przepływowego Becton Dickinson.
Podwójnie zabarwiona immunofluorescencja
Komórki inkubowano jednocześnie z optymalnymi stężeniami przeciwciała monoklonalnego znakowanego FITC i przeciwciała monoklonalnego znakowanego fikoerytryną przez 30 minut w temperaturze 4 ° C. Komórki przemyto dwukrotnie Immusal w Sorvall Cell Washer, utrwalono w procentach paraformaldehydu i analizowano za pomocą cytometrii przepływowej.
Terminalna deoksynukleotydylowa transferaza (TdT)
Rozmyte w cytocynie wymazy utrwalano w absolutnym metanolu przez 30 minut w 4 ° C, inkubowano z Coulter Blocking Agent (CBA-1, Coulter, Hialeah, Fla.) Przez 20 minut w temperaturze pokojowej, a następnie inkubowano z mysim antyludzkim przeciwciałem monoklonalnym TdT ( Coulter) lub niespecyficzne przeciwciało mysie przez 30 minut w temperaturze pokojowej. Preparaty przemyto dwukrotnie solanką buforowaną fosforanem, inkubowano z GAM-FITC przez 30 minut w temperaturze pokojowej i ponownie przepłukano
[przypisy: potworniak zdjęcia, ginemedica, genodiet ]

Tags: , ,

No Responses to “Znaczenie kliniczne ekspresji mieloid-antygen w ostrej białaczce limfoblastycznej wieku dziecięcego ad”

  1. Cosmo Says:

    Najlepiej to robic badania kontrolne

  2. Mindless Bobcat Says:

    [..] Oznaczono ponizsze tresci z artykulu oryginalnego: program stomatologiczny[…]

  3. Cross Thread Says:

    mononukleoza

Powiązane tematy z artykułem: genodiet ginemedica potworniak zdjęcia

Bazylika – co to jest ?
Bazylika - jest to honorowy tytuł, ktory nadawany jest badz przez papieża lub tez na drodze prawa zwyczajowego. Tytul ten otrzymują kościoły ktore wsrod innych tego typu obiektow wyróżniają się ponadstandartowa wartością zabytkową lub tez liturgiczną,badz pielgrzymkową oraz duszpasterską.
Polecamy również:
Przeczytaj też:
Znaczenie kliniczne ekspresji mieloid-antygen w ostrej białaczce limfoblastycznej wieku dziecięcego ad 7

W tej analizie ponownie stwierdzono ekspresję antygenu mieloidowego jako najważniejszego predyktora nawrotu (tab. 3). Gdy w wprowadzaniu cech użyto wartości P wynoszącej 0,01, istotna była ekspresja mieloidowego antygenu (P <0,0001) i wysoka początkowa liczba białych krwinek (P <0,001). Połączenie tych dwóch cech było najpotężniejszym predyktorem nawrotów w dzieciństwie ALL. Analiza krzywych przeżycia na podstawie analizy […]

Znaczenie kliniczne ekspresji mieloid-antygen w ostrej białaczce limfoblastycznej wieku dziecięcego ad 8

U 53 pacjentów (22 procent) analiza komórek szpiku białaczkowego wykazała równoczesną ekspresję antygenów powierzchniowych limfocytów B lub T oraz powierzchniowych antygenów mieloidalnych na komórkach. Odsetek pacjentów z nowo zdiagnozowanym ALL, u których wystąpiła mieszana ekspresja linii był porównywalny z tym, o którym informowali inni.8 9 10 Analiza metodą podwójnej fluorescencji jest najlepszą metodą bezpośredniego wykazania […]

Psalmodia

W południowej Francji, przy ujściu Rodanu do Morza Śródziemnego, widzimy wielkie pustynne i bagniste płaszczyzny poprzecinane licznymi odnogami rzeki i stawami złączonymi bezpośrednio z morzem. Wielkie te tereny należą od VIII w. do probostwa Psalmodi. W r. 1240 król Ludwik Święty w poszukiwaniu nad Morzem śródziemnym mocnego punktu oparcia dla swych zamierzeń politycznych i wojennych […]

DevURL
Partnerzy serwisu: