Znaczenie kliniczne ekspresji mieloid-antygen w ostrej białaczce limfoblastycznej wieku dziecięcego ad

Zliczono co najmniej 500 komórek. Próbki rutynowo wybarwiano barwnikiem Wrighta-Giemsy, odczynnikiem periodycznego acidSchiff i plamką z czarnej B Sudanu i wybarwiano je na obecność merooperoksydazy i esterazy kwasu alfa-naftylowego. Białaczki poddano podklasyfikacji jako L1 lub L2, zgodnie z klasyfikacją francusko-amerykańsko-brytyjską.20, 21 Analizę cytogenetyczną przeprowadzono po hodowli komórek szpiku kostnego w RPMI 1640 (Irvine Scientific, Santa Ana, CA) przez 24 do 72 godzin, zebrano i traktowano demekolcyną (Colcemid) przez godzinę. Komórki traktowano hipotonicznym roztworem chlorku potasu (0,4 procent) i utrwalano w kwasie metanolowo-octowym (3: 1). Przygotowano szkiełka i wykonano banding Giemsa.
Immunofenotypowanie
Przygotowanie komórki
Próbki szpiku kostnego traktowane heparyną rozcieńczono 1: buforem Hanksa z roztworem soli fizjologicznej (Irvine Scientific), nawarstwiono na gradienty Ficoll-Hypaque (Pharmacia, Piscataway, NJ) i odwirowano przy 2000 obr / min przez 30 minut. Jednojądrzaste komórki zebrano na granicy faz Ficoll-Hypaque i osocza i przemyto dwa razy zbuforowanym roztworem soli fizjologicznej Hanksa. Po ostatnim przemyciu komórki ponownie zawieszono w RPMI 1640 z L-glutaminą (2 mM), penicyliną (50 U na mililitr) i dodano streptomycynę (50 mg na mililitr).
Przeciwciała monoklonalne
Tabela 1. Tabela 1. Determinanty antygenowe. Panel monoklonalny-przeciwciało został wybrany do identyfikacji antygenów różnicujących specyficznych względem układu limfatycznego i mieloidalnych (Tabela 1). Zastosowanie panelu przeciwciał pozwoliło zidentyfikować zarówno rodowód, jak i etap różnicowania komórek białaczkowych.
Pośrednia immunofluorescencja
Komórki białaczkowe inkubowano z optymalnymi stężeniami każdego przeciwciała monoklonalnego (na podstawie zaleceń producenta) przez 30 minut w temperaturze 4 ° C. Komórki przepłukano dwukrotnie w Sorvall Cell Washer (Ortho Diagnostic Systems, Raritan, NJ) z Immusal (American Dade, Denville, NJ) i inkubowano z 50 ml rozcieńczenia 1:20 powinowactwa z koniugatem izotiocyjanianu fluoresceiny (FITC). oczyszczona immunoglobulina kozia antimouse (GAM-FITC) (Cappel, Cooper Biomedical, West Chester, PA). Po dwukrotnym przemyciu komórek utrwalono je 1% paraformaldehydem i analizowano za pomocą sortownika komórek aktywowanych fluorescencyjnie Coulter Epics V lub cytometru przepływowego Becton Dickinson.
Podwójnie zabarwiona immunofluorescencja
Komórki inkubowano jednocześnie z optymalnymi stężeniami przeciwciała monoklonalnego znakowanego FITC i przeciwciała monoklonalnego znakowanego fikoerytryną przez 30 minut w temperaturze 4 ° C. Komórki przemyto dwukrotnie Immusal w Sorvall Cell Washer, utrwalono w procentach paraformaldehydu i analizowano za pomocą cytometrii przepływowej.
Terminalna deoksynukleotydylowa transferaza (TdT)
Rozmyte w cytocynie wymazy utrwalano w absolutnym metanolu przez 30 minut w 4 ° C, inkubowano z Coulter Blocking Agent (CBA-1, Coulter, Hialeah, Fla.) Przez 20 minut w temperaturze pokojowej, a następnie inkubowano z mysim antyludzkim przeciwciałem monoklonalnym TdT ( Coulter) lub niespecyficzne przeciwciało mysie przez 30 minut w temperaturze pokojowej. Preparaty przemyto dwukrotnie solanką buforowaną fosforanem, inkubowano z GAM-FITC przez 30 minut w temperaturze pokojowej i ponownie przepłukano
[przypisy: potworniak zdjęcia, ginemedica, genodiet ]

Tags: , ,

No Responses to “Znaczenie kliniczne ekspresji mieloid-antygen w ostrej białaczce limfoblastycznej wieku dziecięcego ad”

  1. Cosmo Says:

    Najlepiej to robic badania kontrolne

  2. Mindless Bobcat Says:

    [..] Oznaczono ponizsze tresci z artykulu oryginalnego: program stomatologiczny[…]

  3. Cross Thread Says:

    mononukleoza

Powiązane tematy z artykułem: genodiet ginemedica potworniak zdjęcia

Bazylika – co to jest ?
Bazylika - jest to honorowy tytuł, ktory nadawany jest badz przez papieża lub tez na drodze prawa zwyczajowego. Tytul ten otrzymują kościoły ktore wsrod innych tego typu obiektow wyróżniają się ponadstandartowa wartością zabytkową lub tez liturgiczną,badz pielgrzymkową oraz duszpasterską.
Przeczytaj też:
Terminale wideo i ryzyko poronień samoistnych czesc 4

Aby rozwiązać problem korelacji wyników, wykonaliśmy dodatkowe analizy dla każdej miary ekspozycji na VDT, jak zaproponowali Zeger i Liang.21. W tych analizach stosuje się klasę uogólnionych równań estymacji, która uwzględnia korelację wyników ciąży dla samą kobietę i dostosowuje ilorazy szans i odpowiadające im błędy standardowe. Pomiary pól elektromagnetycznych Tylko dwa modele VDT były używane przez […]

Okólna linia murów w pierścieniu zewnętrznym

Gdy upłynie kilka wieków i powstanie miasto XIX i XX wieku, spotkamy się z podobnym odsunięciem mieszkaniowych zadań miasta, ale motywowanym już innymi czynnikami — natury ekonomicznej. Dzielnica najstarsza, środkowa, zajmuje teren względnie najrówniejszy. Dzielnice nowsze wyciągają się wzdłuż wąskich grzbietów : ku północo-zachodowi, za bramą zwaną Arco di Agosto, ku północo-wschodowi za Porta Pesa, […]

Wieżowce

Użytkowanie wieżowców biurowych dość często już nasuwało poważne zastrzeżenia, tym bardziej zaś zamieszkiwanie setek i tysięcy ludzi w wieżowcu mieszkaniowym obawy te wzmaga wielokrotnie. Nie wolno przecież zapominać, że w biurach przebywają w ciągu kilku godzin we dnie ludzie zdrowi, fizycznie i duchowo sprawni, gdy w mieszkaniach znaczną cześć stanowią dzieci, osoby starsze, chore lub […]

DevURL
Partnerzy serwisu: