Znaczenie kliniczne ekspresji mieloid-antygen w ostrej białaczce limfoblastycznej wieku dziecięcego ad

Zliczono co najmniej 500 komórek. Próbki rutynowo wybarwiano barwnikiem Wrighta-Giemsy, odczynnikiem periodycznego acidSchiff i plamką z czarnej B Sudanu i wybarwiano je na obecność merooperoksydazy i esterazy kwasu alfa-naftylowego. Białaczki poddano podklasyfikacji jako L1 lub L2, zgodnie z klasyfikacją francusko-amerykańsko-brytyjską.20, 21 Analizę cytogenetyczną przeprowadzono po hodowli komórek szpiku kostnego w RPMI 1640 (Irvine Scientific, Santa Ana, CA) przez 24 do 72 godzin, zebrano i traktowano demekolcyną (Colcemid) przez godzinę. Komórki traktowano hipotonicznym roztworem chlorku potasu (0,4 procent) i utrwalano w kwasie metanolowo-octowym (3: 1). Przygotowano szkiełka i wykonano banding Giemsa.
Immunofenotypowanie
Przygotowanie komórki
Próbki szpiku kostnego traktowane heparyną rozcieńczono 1: buforem Hanksa z roztworem soli fizjologicznej (Irvine Scientific), nawarstwiono na gradienty Ficoll-Hypaque (Pharmacia, Piscataway, NJ) i odwirowano przy 2000 obr / min przez 30 minut. Jednojądrzaste komórki zebrano na granicy faz Ficoll-Hypaque i osocza i przemyto dwa razy zbuforowanym roztworem soli fizjologicznej Hanksa. Po ostatnim przemyciu komórki ponownie zawieszono w RPMI 1640 z L-glutaminą (2 mM), penicyliną (50 U na mililitr) i dodano streptomycynę (50 mg na mililitr).
Przeciwciała monoklonalne
Tabela 1. Tabela 1. Determinanty antygenowe. Panel monoklonalny-przeciwciało został wybrany do identyfikacji antygenów różnicujących specyficznych względem układu limfatycznego i mieloidalnych (Tabela 1). Zastosowanie panelu przeciwciał pozwoliło zidentyfikować zarówno rodowód, jak i etap różnicowania komórek białaczkowych.
Pośrednia immunofluorescencja
Komórki białaczkowe inkubowano z optymalnymi stężeniami każdego przeciwciała monoklonalnego (na podstawie zaleceń producenta) przez 30 minut w temperaturze 4 ° C. Komórki przepłukano dwukrotnie w Sorvall Cell Washer (Ortho Diagnostic Systems, Raritan, NJ) z Immusal (American Dade, Denville, NJ) i inkubowano z 50 ml rozcieńczenia 1:20 powinowactwa z koniugatem izotiocyjanianu fluoresceiny (FITC). oczyszczona immunoglobulina kozia antimouse (GAM-FITC) (Cappel, Cooper Biomedical, West Chester, PA). Po dwukrotnym przemyciu komórek utrwalono je 1% paraformaldehydem i analizowano za pomocą sortownika komórek aktywowanych fluorescencyjnie Coulter Epics V lub cytometru przepływowego Becton Dickinson.
Podwójnie zabarwiona immunofluorescencja
Komórki inkubowano jednocześnie z optymalnymi stężeniami przeciwciała monoklonalnego znakowanego FITC i przeciwciała monoklonalnego znakowanego fikoerytryną przez 30 minut w temperaturze 4 ° C. Komórki przemyto dwukrotnie Immusal w Sorvall Cell Washer, utrwalono w procentach paraformaldehydu i analizowano za pomocą cytometrii przepływowej.
Terminalna deoksynukleotydylowa transferaza (TdT)
Rozmyte w cytocynie wymazy utrwalano w absolutnym metanolu przez 30 minut w 4 ° C, inkubowano z Coulter Blocking Agent (CBA-1, Coulter, Hialeah, Fla.) Przez 20 minut w temperaturze pokojowej, a następnie inkubowano z mysim antyludzkim przeciwciałem monoklonalnym TdT ( Coulter) lub niespecyficzne przeciwciało mysie przez 30 minut w temperaturze pokojowej. Preparaty przemyto dwukrotnie solanką buforowaną fosforanem, inkubowano z GAM-FITC przez 30 minut w temperaturze pokojowej i ponownie przepłukano
[przypisy: potworniak zdjęcia, ginemedica, genodiet ]

Tags: , ,

No Responses to “Znaczenie kliniczne ekspresji mieloid-antygen w ostrej białaczce limfoblastycznej wieku dziecięcego ad”

  1. Cosmo Says:

    Najlepiej to robic badania kontrolne

  2. Mindless Bobcat Says:

    [..] Oznaczono ponizsze tresci z artykulu oryginalnego: program stomatologiczny[…]

  3. Cross Thread Says:

    mononukleoza

Powiązane tematy z artykułem: genodiet ginemedica potworniak zdjęcia

Bazylika – co to jest ?
Bazylika - jest to honorowy tytuł, ktory nadawany jest badz przez papieża lub tez na drodze prawa zwyczajowego. Tytul ten otrzymują kościoły ktore wsrod innych tego typu obiektow wyróżniają się ponadstandartowa wartością zabytkową lub tez liturgiczną,badz pielgrzymkową oraz duszpasterską.
Polecamy również:
Przeczytaj też:
Przepisy i prawa w zakładaniu i budowie miast

W miare rozwoju administracji miejskiej i państwowej, przyjęte już tradycje, przepisy i prawa odgrywają coraz wybitniejszą rolę w zakładaniu i budowie miast i osiedli i tworzą nieraz pewien całokształt, decydujący ostatecznie o konstrukcji i formie miasta. Przykłady wpływów tego czynnika urbanistycznego znajdujemy w różnych okresach historii miasta. W średniowieczu duży wpływ na budowe miast w […]

Dodatnie warunki podstawowe przestrzeni mieszkaniowych

Dodatnie warunki podstawowe to przeważnie bloki i działki luźno i nisko zabudowane, odznaczające się dużą ilością wolnej przestrzeni, światła i słońca. Niewielki względnie wysiłek we właściwej organizacji tych przestrzeni i racjonalizacji dalszej budowy, w urządzeniu ogródków i zadrzewienia, oraz w poprawie stanu zdrowotnego samych domów i mieszkań może doprowadzić do wyników wybitnie dobrych 1 odpowiadających […]

Skuteczna chirurgiczna terapia wspomagająca dla raka odbytnicy wysokiego ryzyka ad

Randomizowane badania wyraźnie wykazały, że dodatek promieniowania nie zmniejsza przeżywalności w porównaniu z samą operacją. W naszej terapii skojarzonej opracowaliśmy schemat, który, jak się spodziewaliśmy, zoptymalizowałby skuteczność chemioterapii fluorouracyl-semusynę jako leczenie uzupełniające przy jednoczesnym zmniejszeniu ryzyka leukemogenezy. Metody Wybór pacjenta Wszyscy pacjenci mieli potwierdzoną histologicznie gruczolakoraka odbytnicy i przeszli potencjalnie leczniczą resekcję. Wycofana próbka zawierała […]

DevURL
Partnerzy serwisu: